Валідація ЗТ-ПЛР тест-системи для диференційної діагностики африканської та класичної чуми свиней
DOI:
https://doi.org/10.31548/dopovidi2017.06.014Ключові слова:
африканська чума свиней (АЧС), класична чума свиней (КЧС), ЗТ-ПЛР у режимі реального часу, валідаціяАнотація
В Інституті ветеринарної медицини НААН розроблено тест-систему для диференційної діагностики африканської та класичної чуми свиней методом зворотно-транскриптазної полімеразної ланцюгової реакції (ЗТ-ПЛР) у режимі реального часу. Запропонована методика дозволяє одночасно в одній пробірці виявляти три мішені: вірус АЧС, вірус КЧС і внутрішній контроль, що сприяє економії часу та коштів. У статті представлені результати проведення внутрішньолабораторної валідації розробленого ЗТ-ПЛР діагностикума. Валідацію здійснювали відповідно до міжнародних вимог за показниками чутливості, специфічності і збіжності. Межа виявлення (LOD) валідованого ЗТ-ПЛР діагностикума склала 10 копій ДНК вірусу АЧС і 10 копій кДНК вірусу КЧС. Встановлено достатньо високу збіжність результатів. При дослідженні специфічності не спостерігалось перехресних реакцій із штамами патогенів, що викликають подібні з АЧС і КЧС симптоми (цирковірус свиней 2-го типу, вірус репродуктивно-респіраторного синдрому свиней і хвороби Ауєскі). Вцілому, досліджені аналітичні показники валідованої ЗТ-ПЛР тест-системи для диференціальної діагностики АЧС та КЧС відповідають міжнародним стандартам, що гарантує отримання точних та надійних результатів. Ця тест-систума стане цінним засобом швидкої диференційної діагностики в разі виникнення підозри на спалах чуми свиней.
Посилання
«Development and optimisation of Nucleadacid detection assays» (2014). OIE Validation Guidelines - 3.6.3. Avaiable at: http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Health_standards/aahm/current/GUIDELINE_3.6.3_NAD_ASSAYS.pdf.
Gallardo, C., Reoyo, A. T., Fernández-Pinero, J., Iglesias, I., Muñoz, J. and Arias, L. (2015). African swine fever: a global view of the current challenge. Porcine Health Management, 1, 1-14.
https://doi.org/10.1186/s40813-015-0013-y
Korniienko, L.Ie. (2014). Afrykanska chuma svynei: istorychni aspekty, suchasna epizootychna sytuatsiia v sviti y v Ukraini, imunitet ta perspektyvy vaktsynoprofilaktyky [African swine fever: historical aspects, current epizootic situation in the world and in Ukraine and prospects for vaccine immunity]. Naukovyi visnyk veterynarnoi medytsyny - Scientific Journal of Veterinary Medicine,14 (114), 5-12 [in Ukrainian].
Korniienko, L.Ie. (2015). Clasichna chuma sviney: istorichni aspekti, suchasna epizootichna situatsiya v sviti ta ukrayini, imunitet i vaktsinoprofilaktika [A historical perspective, modern epizootic situation in the world and in Ukraine, immunity and the vaccine of classical swine feve]. Naukovyi visnyk veterynarnoi medytsyny - Scientific Journal of Veterinary Medicine, 2, 5-13 [in Ukrainian].
Maksimovich, V. V. and Semenov, S. V. (2016). Differentsialnaya diagnostika afrikanskoy chumyi sviney [Differencial diagnosis o African swine fever]. Uchenyie zapiski UO VGAVM - Scientific notes UO VSAVM], 52 (1), 60-67 [in Russian].
Mandygra, S.S., Muzykina, L.M., Ishchenko, L.M., Kovalenko, G.A., Halka, I.V., Sytjuk, M.P., Nychyk, S.A. and Spyrydonov, V.G. (2017). Rozrobka test-systemy dlia dyferentsiinoi diahnostyky afrykanskoi ta klasychnoi chumy svynei metodom ZT-PLR u rezhymi realnoho chasu [Development of the test kit for the differential diagnostics of african and classical swine fever by RT-PCR in real time]. Veterynarna biotekhnolohiia - Veterinary Biotehnology, 31, 103-111 [in Ukrainian].
https://doi.org/10.31073/vet_biotech31-12
Moennig, V., Floegel-Niesmann, G., Greiser-Wilke, I. (2003). Clinical signs and epidemiology of classical swine fever: a review of new knowledge. Veterinary Journal, 165, 11-20.
https://doi.org/10.1016/S1090-0233(02)00112-0
Nevolko, O. M. (2015). Dyferentsiina diahnostyka pry afrykanskii chumi svynei [Differential diagnosis of African swine fever]. Veterynarna Medytsyna Ukrainy - Veterinary Medicine of Ukraine, 7, 14-19 [in Ukrainian].
Завантаження
Опубліковано
Номер
Розділ
Ліцензія
Стосунки між правовласниками і користувачами регулюються на умовах ліцензії Creative Commons Із Зазначенням Авторства – Некомерційна – Поширення На Тих Самих Умовах 4.0 Міжнародна (CC BY-NC-SA 4.0):https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/deed.uk
Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:
- Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
- Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див.The Effect of Open Access).
