Оцінка мультиплексного варіанту TaqMan REAL-TIME RT-PCR аналізу для виявлення пандемічного вірусу грипу A(H1N1)pdm в клінічних зразках хворих на грип

Автор(и)

  • S. V. Stepaniuk Diaprof-Med JSC , ПрАТ НВК «Діапроф-Мед»
  • V. A. Shevchuk Diaprof-Med JSC , ПрАТ НВК «Діапроф-Мед»
  • M. Y. Spivak Institute of Microbiology and Virology. DK Zabolotny, NAS of Ukraine , Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України

DOI:

https://doi.org/10.31548/dopovidi2016.05.006

Ключові слова:

пандемічний вірус грипу A(H1N1)pdm, полімеразна ланцюгова реакція в режимі реального часу, діагностична тест-система

Анотація

Актуальність – сучасна діагностика пандемічних штамів вірусу грипу молекулярними методами. Мета провести оцінку мультиплексного варіанту методу TaqMan Real-Time RT-PCR аналізу для швидкої та специфічної діагностики пандемічного вірусу грипу A(H1N1)pdm в клінічних зразках хворих на грип. Методи: Полімеразна ланцюгова реакція в режимі реального часу(Real-Time RT-PCR). Встановлено, що методика мультиплексного TaqMan Real-Time RT-PCR аналізу та розроблені праймери та TaqMan-зонди, що входять до складу вітчизняної тест-системи «DIA Influenza H1N1» здатні виявляти зі 100 % чутливістю та специфічністю РНК Каліфорнійських штамів пандемічного вірусу грипу A(H1N1)pdm серед клінічних зразків з сезонними штамами вірусу грипу. Аналітична чутливість тесту визначена на рівні 10 копій в реакції. Запропонована методика TaqMan Real-Time RT-PCR є ефективним інструментом швидкого та точного виявлення високопатогенних пандемічних штамів вірусу грипу A(H1N1)pdm 2009 року.

 

Біографії авторів

  • автор S. V. Stepaniuk, афіліація Diaprof-Med JSC, ПрАТ НВК «Діапроф-Мед»
    здобувач
  • автор V. A. Shevchuk, афіліація Diaprof-Med JSC, ПрАТ НВК «Діапроф-Мед»
    кандидат медичних наук
  • автор M. Y. Spivak, афіліація Institute of Microbiology and Virology. DK Zabolotny, NAS of Ukraine, Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України
    академік НАН України, доктор біологічних наук, професор

Посилання

European Centre for Disease Prevention and Control/WHO Regional Office for Europe. Flu News Europe, Joint ECDC-WHO. Available at: http://www.flunewseurope.org/Archives

Strategic advisory group of experts on immunization - report of the extraordinary meeting on the influenza A (H1N1) 2009 pandemic (7 July 2009); Human infection with pandemic A (H1N1) 2009 influenza virus: clinical observations in hospitalized patients, Americas (July 2009 - update) // Weekly Epidemiological Record (WHO).-2009.-84, N 30.-P. 301-308.

Mironenko A. P. Pandemia of influenza in Ukraine in 2009-2010 winter season: lessons learned for future / Mironenko A. P., Onishchenko O. V., Golubka O. S., Kurinko N. A., Leibenko L. V. // Liky Ukrainy. - 2010.- N 10 (146). - P. 86-90.

Leibenko L. V. Phylogenetic analysis of nfluenza A(H1N1) pdm viruses isolated in Ukraine during the 2009-2010 pandemic season / Leibenko L. V., Polischuk V. P., Mironenko A. P. // Biopolymers and Cell. - 2013. - Vol. 29, N 2. - P. 143-149.

https://doi.org/10.7124/bc.000812

Hryp ta HRVI v Ukraini. Informatsiinyi biulleten. - Kyiv, 2016. - 19 s.

Analiz rozpovsiudzhennia ptashynoho hrypu H5N1 u sviti ta Ukraini u 2005. Informatsiino-analitychne povidomlennia. - 2010 rr. - Simferopol, 2011.

World Health Organization. WHO information for laboratory diagnosis of new influenza A (H1N1) virus in humans. Diagnostic Recommendations H1N1.200090521. Available at: http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/WHO

Dreier J. Use of Bacteriohyage MS2 as an Internal Control in Viral Reverse transcription-PCR Assays. / Dreier, J., Stormer, M., Kleesiek, //J Clin Microbiol., K. 2005., 43(9), 4551-4557.

https://doi.org/10.1128/JCM.43.9.4551-4557.2005

WHO Recommendations: CDC protocol of real-time RT-PCR for influenza A(H1N1), revision 2 (6 October 2009). Available at: http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/realtimeptpcr

Завантаження

Опубліковано

2016-09-14

Номер

Розділ

Біологія, біотехнологія, екологія