Ізоляція коронавірусу ВРХ в культурах клітин

Автор(и)

  • A. Berezenko Національний університет біоресурсів і природокористування України image/svg+xml
  • V. Nedosekov Національний університет біоресурсів і природокористування України image/svg+xml
  • O. Godovskiy BIOTESTLAB Ltd , ТОВ "Біотестлаб"

DOI:

https://doi.org/10.31548/dopovidi2021.04.001

Ключові слова:

Coronaviridae, біологічні властивості, коронавірус великої рогатої худоби, культивування вірусів, культура клітин, інфекційна активність

Анотація

Одним із найбільш поширених у світі вірусів, що спричиняє захворювання у великої рогатої худоби є коронавірус ВРХ (BCoV). Цей вірус є збудником інфекції респіраторного та шлунково-кишкового тракту в новонароджених телят, що призводить до значних економічних втрат, як у молочному, так і в м’ясному напрямах тваринництва. З огляду на складну епізоотичну ситуацію щодо коронавірусів у світі та часткову антигенну спорідненість ВCoV з коронавірусами інших видів тварин та людини, вкрай важливим і актуальним стає виділення нових штамів коронавірусів, їх ідентифікація та оптимізація умов культивування.

Метою наших досліджень було визначити особливості методів виділення коронавірусу ВРХ та підібрати способи його культивування в культурі клітин із метою отримання вірусу з найбільшими титрами інфекційної активності.

Експериментально доведена чутливість культуральних систем до вірусу і встановлено, що використання перещеплюваної лінії культури клітин нирки теляти (МДБК) та первинно-трипсинізованої культури клітин нирки ембріона теляти (НЕТ) дозволяють отримати вірусовмісну суспензію з титром інфекційної активності 5,54±0,16 lg ТЦД50/1,0 мл та 5,59±0,14 lg ТЦД50/1,0 мл відповідно, що є перспективним для біотехнологічних розробок.

Подальші дослідження планується спрямувати на дослідження отриманого вірусного ізоляту для послідуючої розробки засобів діагностики та імунопрофілактики коронавірусної інфекції у ветеринарній медицині.

Посилання

Nedosiekov, V. V., Blakha, T., Sytiuk, M. P., Martyniuk, O. H., Melnyk, V. V., & Yustyniuk, V. Ye. (2021). Osnovy biobezpeky ta blahopoluchchia tvaryn. [Fundamentals of biosafety and animal welfare ] Nizhyn.

Nedosiekov, V., Khaunkhorst, E., Sytnik, V., Shevchuk, V., & Zhukovskyi, M. (2019). Orhanizatsiia ta ekonomika veterynarnoi spravy. [organization and economics of veterinary affairs]: navch. posibnyk. Kyiv: NUBiP Ukrainy.

Bok, M., Alassia M., Frank, F., Vega, C. G., Wigdorovitz, A., Parreno, V. (2018). Passive immunity to control bovine coronavirus diarrhea in a dairy herd in Argentina. Rev Argent Microbiol. 50:23-30. https://doi.org/10.1016/j.ram.2017.03.007

Clark, M. A. (1993). Bovine coronavirus. Br Vet J. 149:51-70. https://doi.org/10.1016/S0007-1935(05)80210-6

Dea, S., Roy, R. S., & Begin, M. E. (1980). Bovine coronavirus isolation and cultivation in continuous cell lines. American journal of veterinary research, 41(1), 30-38.

Decaro, N., & Lorusso, A. (2020). Novel human coronavirus (SARS-CoV-2): A lesson from animal coronaviruses. Veterinary microbiology, 244, 108693. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2020.108693.

Forni, D., Cagliani, R., Clerici, M., & Sironi, M. (2017). Molecular evolution of human coronavirus genomes. Trends in microbiology, 25(1), 35-48.

https://doi.org/10.1016/j.tim.2016.09.001

Inaba, Y., Sato, K., Kurogi, H., Takahashi, E., Ito, Y., Omori, T., ... & Matumoto, M. (1976). Replication of bovine coronavirus in cell line BEK-1 culture. Archives of virology, 50(4), 339-342.

https://doi.org/10.1007/BF01317959

Jerez, J. A., Gregori, F., Brandão, P. E., Rodriguez, C. A. R., Ito, F. H., Buzinaro, M. D. G., & Sakai, T. (2005). Isolation of bovine coronavirus (BCoV) in monolayers of HmLu-1 cells. Brazilian Journal of Microbiology, 36(3), 207-210. https://doi.org/10.1590/s1517-83822005000300001

Mebus, C. A., CA, M., EL, S., MB, R., & MJ, T. (1973). Neonatal calf diarrhea: propagation, attenuation and characteristics of a coronavirus-like agent.

Saif, L. J., Wang, Q., Vlasova, A. N., Jung, K., & Xiao, S. (2019). Coronaviruses. Diseases of swine, 488-523.

https://doi.org/10.1002/9781119350927.ch31

Sato, K., Inaba, Y., Kurogi, H., Takahashi, E., Ito, Y., Goto, Y., ... & Matumoto, M. (1977). Physico-chemical properties of calf-diarrhea coronavirus. Veterinary Microbiology, 2(1), 73-81. https://doi.org/10.1016/0378-1135(77)90034-7

Takahashi, E., Inaba, Y., Sato, K., Ito, Y., Kurogi, H., Akashi, H., ... & Omori, T. (1980). Epizootic diarrhoea of adult cattle associated with a coronavirus-like agent. Veterinary Microbiology, 5(2), 151-154. https://doi.org/10.1016/0378-1135(80)90019-X

NCBI Taxonomy Browser URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/Taxonomy/Browser/wwwtax.cgi?mode=Info&id=11128&lvl=3&lin=f&keep=1&srchmode=1&unlock

Завантаження

Опубліковано

2021-08-31

Номер

Розділ

Біологія, біотехнологія, екологія