Тест-система ІФА для метапневмовірусної інфекції птиці: методологія розробки та використання у ветеринарній практиці

Автор(и)

  • O.V. Tsinoviy , Державна дослідна станція птахівництва НААН
  • L.I. Nalyvayko , Державна дослідна станція птахівництва НААН

DOI:

https://doi.org/10.31548/poultry2021.05-06.024

Ключові слова:

кури, сироватки крові, діагностика, ІФА, метапневмовірус

Анотація

За відсутності діагностичних наборів для визначення антитіл до метапневмовірусної інфекції (МПВІ) епізоотологічний моніторинг у господарствах України практично не проводиться, імпортні тест-системи мають високу вартість, тому виникла потреба у вітчизняних методах діагностики даного захворювання. Найбільш точним методом і простим у використанні є тест- система на основі ІФА (імуноферментного аналізу).

Мета досліджень – розробка вітчизняної діагностичної тест-системи ІФА щодо метапневмовірусної інфекції.

Розроблено діагностичну тест-систему ІФА для визначення антитіл до МПВІ та встановлено, що цей діагностикум бажано використовувати в практиці ветеринарної медицини для серологічного контролю метапневмовірусної інфекції.

Відпрацьовано оптимальні співвідношення компонентів для виготовлення ІФА тест-системи. Розраховано формулу обрахунку титрів антитіл у сироватках крові курчат при тестуванні їх в одному розведенні.

Визначено чутливість і специфічність тест-системи ІФА (порівняльний аналіз результатів тестування сироваток у ІФА, РНГА (реакції непрямої гемаглютинації) та в РН (реакції нейтралізації). Розроблено наукову документацію – інструкцію з виготовлення та контролю тест-систем ІФА для виявлення антитіл до метапневмовірусної інфекції в сироватках крові курей та настанову з її використання.

Було проведено індикацію та ідентифікацію отриманого ізоляту вірусу, її здійснювали методом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) та нуклеотидного секвенування. На підставі проведених досліджень у суспензії внутрішніх органів індиків (трахея, легені) виявлено вірус, який відносився до підтипу В роду Metapneumovirus, підродини Рneumovirinae, родини Paramyxoviridae порядку Mononegavirales.

Згідно порівняння нуклеотидної послідовності фрагмента гена G штаму "PVT-09/B" з послідовностями штамів та ізолятів метапневмовірусу птиці підтипу В, що опубліковані в базі даних GenBank, встановлено, що ізольований від хворих індиків метапневмовірус філогенетично близький бразильським штамам пневмовірусу (aMPV chicken B Brazil 27A-07 2007 та MPV/B/Brazil-07/USP-08 G).

Посилання

Abgaryan, S.R. (2020). Epizootologicheskie osobennosti metapnevmovirusny infektsii ptits u kur-nesushek [Epizootological features of metapneumovirus infection of birds. in laying hens]. All-Russian Scientific Research Institute of Poultry. Sankt-Peterburg, 131. [in Russian].

Borisova, I.A., & Starov, S.K (2006). Pnevmovirusnaya infektsiya ptits [Pneumovirus infection of birds]. Trudyi Federalnogo tsentra ohranyi zdorovya zhivotnyih [Proceedings of the Federal Center for Animal Health]. Vladimir, 4, 281-296. [in Russian].

Вochkarev, V.S. (2013). Immunologicheskie svoystva vaktsinnyih shtammov metapnevmovirusa ptits [Immunological properties of avian metapneumovirus vaccine strains]. All-Russian Scientific Research Institute of Poultry]. Sankt-Peterburg, 21. [in Russian].

Cook, J.K.A., & Cavanagh, D. (2002). Detection and differentiation of avian pneumoviruses (metapneumoviruses). Avian Pathology, 31, 117-132. https://doi.org/10.1080/03079450120118603 [in English].

Dmitriev, D.V. (2010). Serologicheskiy monitoring na metapnevmovirusnuyu infektsiyu ptits na osnove immunofermentnogo analiza [Serological monitoring for avian metapneumovirus infection based on enzyme-linked immunosorbent assay].Veterinarnaya praktika [Veterinary practice], 2(49), 20-22. [in Russian]

Felippe, P.A., Silva, L.H.A., Santos, M.B., Sakata, S.T., & Arns C.W. (2011). Detection of and phylogenetic studies with avian metapneumovirus recovered from feral pigeons and wild birds in Brazil. Avian Pathology, 40(5), 445-452. https://doi.org/10.1080/03079457.2011.596812 [in English].

Giovanni, F., Matteo, L., Giulia, M., Claudia, M.T., Caterina, L.; Giulia, Q., Elen, C., & Mattia, C. (2020). Avian Metapneumovirus subtype B around Europe: A phylodynamic reconstruction. Veterinary Research, 51, 88. https://doi.org/10.1186/s13567-020-00817-6 [in English].

Hristova, M., & Petrova, R. (2017). Coinfection of chichen anatmia virus mycoplasma galisepticum. Avian metapneumovirus and avian reovirus in fancy chicken. Tradition and modernity in veterinary medicine, 2(2), 17-22. [in English].

Irza, V.N., Okovyitaya, T.V., & Borisov, V.V. (2003).Serologicheskiy monitoring po ptichemu pnevmovirusu (Avian Pneumovirus - APV) v Rossii: materialyi konferentsii po ptitsevodstvu [Avian Pneumovirus (APV) Serological Monitoring in Russia: Proceedings of the Poultry Conference]. Zelenograd, 222-223. [in Russian].

Jiang, N., Jiang, F., Sun, F.,Wang, K., & Wang, S. (2020). Research progress on avian Metapneumovirus. Chinese Animal Health Inspection, 37, 86-91. [In Chinese].

Lisenkova, A.S. (2013). Ekspress-metod diagnostiki metapnevmovirusnoy infektsii ptits na osnove immunofermentnogo analiza [Rapid method for diagnosing metapneumovirus infection in birds based on enzyme-linked immunosorbent assay]. All-Russian Scientific Research Institute of Poultry. Sankt-Peterburg 23. [in Russian].

Nikitina, N.V., Trefilov, B.B., & Lisenkova, A.S. (2012). Vliyanie fiziko-himicheskih faktorov na chuvstvitelnost i spetsifichnost immunofermentnogo analiza [The influence of physicochemical factors on the sensitivity and specificity of the enzyme immunoassay]. Veterinarnaya praktika [Veterinary practice], 2(57), 36-39. [in Russian].

Umar, S., Sabir, H., Ahmed, A., & Subhan, S. (2016). Avian metapneumovirus infection in poultry. World's Poultry Science Journal, 72(4), 833-846. https://doi.org/10.1017/S0043933916000738 [in English].

Volkova, M.A. (2003). Nepryamoy variant immunofermentnogo metoda dlya opredeleniya antitel k pnevmovirusu ptits: materialyi mezhdunarodnoy nauchnoy konferentsii FGU " VNIIZZh" [An indirect variant of the enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of antibodies to avian pneumovirus: materials of the international scientific conference of FGU "VNIIZZh"]. Aktualnyie problemyi infektsionnoy patologii zhivotnyih [Actual problems of infectious pathology of animals]. Vladimir, 358-361. [in Russian].

Yu, M., Xing, L., Chang, F., Bao, Y., Wang, S., He, X., … Gao, Yu. (2019). Genomic sequence and pathogenicity of the first avian Metapneumovirus subtype B isolated from chicken in China. Veterinary Microbiology, 228, 32-38. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2018.11.009 [In Chinese].

Zhu, Y., Gong, X., Guo, W., Xu, B., Li, L., Lang, F., Liu, H., Liu, D., & Fan, H. (2016). Molecular epidemiological analysis of avian Metapneumovirus in some areas of China from 2012 to 2015. Prog. Veterynary Medical, 37, 30-34. [In Chinese].

Завантаження

Опубліковано

2021-09-05

Номер

№ 5-6 (2021)

Розділ

Ветеринарія

Ліцензія

Стосунки між правовласниками і користувачами регулюються на умовах ліцензії Creative Commons Із Зазначенням Авторства – Некомерційна – Поширення На Тих Самих Умовах 4.0 Міжнародна (CC BY-NC-SA 4.0):https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/deed.uk

Автори, які публікуються у цьому журналі, погоджуються з наступними умовами:

  • Автори залишають за собою право на авторство своєї роботи та передають журналу право першої публікації цієї роботи на умовах ліцензії Creative Commons Attribution License, котра дозволяє іншим особам вільно розповсюджувати опубліковану роботу з обов'язковим посиланням на авторів оригінальної роботи та першу публікацію роботи у цьому журналі.
  • Автори мають право укладати самостійні додаткові угоди щодо неексклюзивного розповсюдження роботи у тому вигляді, в якому вона була опублікована цим журналом (наприклад, розміщувати роботу в електронному сховищі установи або публікувати у складі монографії), за умови збереження посилання на першу публікацію роботи у цьому журналі.
  • Політика журналу дозволяє і заохочує розміщення авторами в мережі Інтернет (наприклад, у сховищах установ або на особистих веб-сайтах) рукопису роботи, як до подання цього рукопису до редакції, так і під час його редакційного опрацювання, оскільки це сприяє виникненню продуктивної наукової дискусії та позитивно позначається на оперативності та динаміці цитування опублікованої роботи (див.The Effect of Open Access).