Розробка протоколу виявлення патогенних лептоспір методом полімеразної ланцюгової реакції

Authors

  • В. В. Уховський Інститут ветеринарної медицини НААН, м. Київ
  • В. В. Куликова Інститут ветеринарної медицини НААН, м. Київ
  • А. П. Герілович Національний науковий центр«Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини», м. Харків
  • О. С. Солодянкін Національний науковий центр«Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини», м. Харків

Abstract

Стаття присвячена розробці ПЛР-протоколу виявлення генетичного
матеріалу патогенних лептоспір. Встановлено, що праймерна система
LipL 32 проявляє виражену гібридизаційну активність по відношенню до ДНК-
матриці при 55ºС. Протокол, створений на основі праймерної системи LipL
32, забезпечував виявлення восьми серогруп патогенних лептоспір,
найбільш розповсюджених в Україні: Australis, Canicola, Grippotiphosae,
Hebdomadis, Icterohaemorrhagiae, Pomona, Sejroe, Tarassovi. Встановлено, що
створені праймери не утворюють ампліконів з ДНК-матрицями мікоплазм,
хламідій та сапрофітних (непатогенних) лептоспір.

Author Biographies

  • В. В. Уховський, Інститут ветеринарної медицини НААН, м. Київ

    Кандидат ветеринарних наук, старший науковий співробітник,

  • В. В. Куликова, Інститут ветеринарної медицини НААН, м. Київ

    Кандидат ветеринарних наук, старший науковий співробітник

  • А. П. Герілович, Національний науковий центр«Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини», м. Харків

    Доктор ветеринарних наук, старший науковий співробітник

  • О. С. Солодянкін, Національний науковий центр«Інститут експериментальної і клінічної ветеринарної медицини», м. Харків

    Кандидат біологічних наук, старший науковий співробітник

References

Земская М. С. Дифференциация лептоспир различных экологических групп на основе гена, кодирующего липопротеин наружной мембраны LipL32: автореф. дис. на соискание научн. степени канд. мед. наук: спец. 03.00.07

«Микробиогогия» / М. С. Земская. – Москва, 2009. – 24 с.

Лептоспироз животных / Ю. А. Малахов, А. Н. Панин, Г. Л. Соболева. – Я. : Д?А-пресс, 2000. – 584 с.

Наконечна Т. Епізоотологічна та епідеміологічна ситуація з лептоспірозу на півдні України / Т. Наконечна // Ветеринарна медицина України. – 2002. – № 7. – С. 27-29.

Роcада М. О. Удосконалення епідеміологічного нагляду за лептоспіро- зами шляхом застосування серологічних методів: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец.14.02.02 ,,Епідеміологія ” / М. О. Росада. – Київ, 2003. – 21 с.

Романюк Ж. В. Епізоотологічні особливості та удосконалення профілактики лептоспірозу великої рогатої худоби в господарсвах Житомирської області: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. вет. наук: спец. 16.00.08

,,Епізоотологія та інфекційніхвороби” / Ж. В. Романюк. – К., 2006. – 20 с.

Уховський В. В. Епізоотолого-географічна характеристика лептоспірозу ВРХ на території України / В. В. Уховський // Науково-технічний бюлетень. – Львів. – 2010. – Вип. 11, № 2-3. – С. 263-268.

Bomfim M. R., Koury M. C. Evaluation of LSSP-PCR for identification of Leptospira spp. in urine samples of cattle with clinical suspicion of leptospirosis / M. R. Bomfim, M. C. Koury // Vet. Microbiol. – 2006. – Vol. 118(3-4). – P. 278-288.

Calcium binds to Lip L 32, a lipoprotein from pathogenic Leptospira, and modulates fibronectin binding / J. Y. Tung, C. W. Yang, S. W. Chou [et al.] // J. Biol. Chem. – 2010. – Vol. 285. – P. 3245-3252.

Gel purified Lip L 32: a prospective antigen for detection of leptospirosis / P. Tahiliani, M. M. Kumar, D. Chandu [et al.] // J. Postgrad. Med. – 2005. – Vol. 51(3). – P. 164-168.

Leptospira and leptospirosis / S. Faine, B. Adler, C. Bolin, P. Perolat. – Melbourne: MediSci,– 1999. – 154 р.

Leptospirosis worldwide // Weekly Epidemiol. Rec. – 1999. – Vol. 74. – P. 237-242.

Pinne M., Haake D. A. LipL32 is a subsurface lipoprotein of Leptospira

interrogans: presentation of new data and reevaluation of previous studies / M. Pinne, D. A. Haake // PLoS One. – 2013. – Vol. 8(1). – P. 302-310.

Rapid and simple method for purification of nucleic acids / R. Boom, C. J. Sol, M. M. Salimans [et al.] // Journal of clinical microbiology. – 1990. – 28(3). – P. 495-503.

Validation and quality control of polymerase chain reaction metods used for the diagnosis of infectious diseases. In OIE manual 2004 [Електронний ресурс]. – Режим доступу: http://www.oie.int/eng/normes/manual/a_00014.htm.